<acronym id="yaw0g"><noscript id="yaw0g"></noscript></acronym><object id="yaw0g"></object>
<sup id="yaw0g"></sup>
您好!歡迎訪(fǎng)問(wèn)和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司網(wǎng)站!
咨詢(xún)熱線(xiàn)

18616108692

當前位置:首頁(yè) > 技術(shù)文章 > BCA蛋白定量試劑盒價(jià)格是多少(蛋白定量試劑盒使用方法)

BCA蛋白定量試劑盒價(jià)格是多少(蛋白定量試劑盒使用方法)

更新時(shí)間:2024-05-24      點(diǎn)擊次數:151

BCA (Bicinchoninic acid) 法是目前應用比較廣泛的蛋白質(zhì)濃度測定方法?;陔p縮脲反應,即在堿性環(huán)境下蛋白質(zhì)將Cu2+還原成Cu+,Cu+與BCA試劑形成紫顏色的絡(luò )合物,在562 nm處有高的吸光值,該反應產(chǎn)物的量與蛋白質(zhì)濃度成正比。測定其在562 nm處的吸光值,并與標準曲線(xiàn)對比,即可計算待測蛋白的濃度。該方法快速靈敏、穩定可靠且對不同種類(lèi)蛋白質(zhì)變異系數很小。試劑盒中提供了濃度穩定的蛋白標準品用于制作標準曲線(xiàn)。

BCA 蛋白定量試劑盒可用于試管法檢測,也可用于微孔板法檢測。試管法需較大量蛋白樣品(100 μL)和工作液(2 mL),蛋白樣品與 BCA 工作液的比率為1:20(v/v),蛋白質(zhì)測定范圍為20-2000 μg/mL,采用加強法可以檢測到 5 μg/mL;微孔板法操作簡(jiǎn)單方便,僅需少量(10-25 μL)的蛋白樣品和工作液(200 μL),蛋白樣品與工作液的比率為1:20(v/v)或者1:8(v/v),蛋白質(zhì)測定范圍為 20-2000 μg/mL,采用加強法可以檢測到 5 μg/mL。

BCA蛋白定量試劑盒價(jià)格是多少?

李記生物BCA蛋白定量試劑盒價(jià)格198元,規格500T!

BCA蛋白定量試劑盒使用方法

一、配制標準品和工作液

1. 配制 BSA 標準品體系(線(xiàn)性范圍20-2000 μg/mL或者5-250μg /mL標準品制備各2種配置方法,請根據習慣選用恰當方式)?!咀ⅰ浚築SA 標準品濃度為2 mg/mL,稀釋液為蛋白樣品的溶解液,原則上蛋白樣品在什么溶液中,標準品也宜用什么溶液稀釋。但也可用水或 1 X PBS 進(jìn)行稀釋。

BSA 標準品體系配制表(配制后可放置于4℃ 冰箱多次使用)

表1.微孔板檢測BSA 標準品體系配制(線(xiàn)性范圍 20-2000 μg/mL)配置方法一

Vial

稀釋液體積(μL)

BSA標準品體積(μL)

BSA終濃度(μg/mL)

A

0

100

2000

B

25

75

1500

C

50

50

1000

D

83

50

750

E

75

25

500

F

140

20

250

G

150

10

125

H

158

2

25

I

100

0

0=Blank

表2.微孔板檢測BSA 標準品體系配制(線(xiàn)性范圍 20-2000 μg/mL)配置方法二

Vial

稀釋液體積(μL)

BSA標準品體積(μL)

BSA終濃度(μg/mL)

A

0

BSA 標準液100

2000

B

25

BSA 標準液75

1500

C

65

BSA 標準液65

1000

D

35

Vial B 35

750

E

65

Vial C 65

500

F

65

Vial E 65

250

G

65

Vial F 65

125

H

80

Vial G 20

25

I

80

0

0=Blank

表3.BSA標準品體系(微孔板檢測,線(xiàn)性范圍 5-250μg /mL)配置方法一

Vial

稀釋液體積(μL)

BSA標準品體積(μL)

BSA終濃度(μg/mL)

A

70

10

250

B

75

5

125

C

78

2

50

D

79

1

25

E

399

1

5

F

80

0

0

表4.BSA標準品體系(微孔板檢測,線(xiàn)性范圍 5-250μg /mL)配置方法二

Vial

稀釋液體積(μL)

BSA標準品體積(μL)

BSA終濃度(μg/mL)

A

70

BSA 標準液10

250

B

40

Vial A 40

125

C

45

Vial B 30

50

D

40

Vial C 40

25

E

40

Vial D 10

5

F

40

0

0

2. 配制 BCA工作液

(1) 計算所需要的總BCA 工作液體積??侭CA工作液體積=(標準品數量+待測樣品數量)x重復數x每個(gè)樣品所需要的BCA 工作液?!咀ⅰ浚涸嚬芊z測時(shí)每個(gè)樣品加 2.0 mL BCA 工作液,微孔板檢測每個(gè)樣品加200 μL BCA 工作液。

(2) 配制BCA工作液:50 體積的BCA 試劑 A 中加入1 體積的BCA 試劑B(A:B=50:1),充分混勻?!咀ⅰ浚築CA工作液裝入密封容器內,室溫條件24h 穩定。

二、檢測方法

1. 試管檢測方法(樣品:BCA工作液=1:20)

(1) 各取100 μL 標準品和待測樣品加入到反應管中。

(2) 每管加入2.0 mL BCA 工作液,混勻。根據待測樣品的濃度范圍選擇孵育時(shí)間和溫度。

標準孵育方法:37℃ 孵育30 min 或者室溫2h(檢測范圍:20-2000 μg/mL)

增強孵育方法:60℃ 孵育30 min(檢測范圍:5-250 μg/mL)

【注】:BCA 檢測蛋白濃度,延長(cháng)孵育時(shí)間會(huì )加深顏色反應。升高溫度會(huì )加快顯色反應,但是溫度升高和時(shí)間延長(cháng)會(huì )降低檢測下限,以及降低工作線(xiàn)性范圍。若蛋白濃度很低,可在較高溫度孵育或者適當延長(cháng)孵育時(shí)間。

(3) 冷卻到室溫。在分光光度計上進(jìn)行檢測,設定波長(cháng)為 562 nm,在10 min內對所有樣品讀數?!咀ⅰ浚河捎贐CA 反應達不到真正的反應終點(diǎn),即使溫度降低至室溫生色反應液會(huì )繼續。但是,由于室溫下生色比率相當低,因此若是10 min 內能對所有的樣本進(jìn)行 562 nm 吸光度的測試,不會(huì )導致明顯錯誤。

(4) 根據BSA 標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD 值即最終的讀數),繪制標準曲線(xiàn)(X-蛋白濃度μg/mL;Y-最終的OD 562nm)。依據標準曲線(xiàn)和樣品的稀釋倍數計算樣品蛋白濃度。

2. 微孔板檢測方法(樣品: BCA工作液=1:20)

(1) 各取10 μL標準品和待測樣品加入到微孔板中?!咀ⅰ浚簶悠放c工作液比例為1:20,檢測范圍為125-2000 μg/mL。若樣品濃度非常低,可使用25μL 標準品和待檢測樣品進(jìn)行檢測(即1:8),這時(shí)試劑盒的檢測范圍為 20-2000 μg/mL。

(2) 每孔加入200 μL BCA 工作液,槍頭吹打充分混勻。蓋上微孔板,37℃ 孵育30 min。

(3) 冷卻到室溫,在酶標儀上的562 nm 波長(cháng)范圍處檢測吸光度。

(4) 根據BSA標準品的吸光度(減去標準品中空白孔的OD值即最終的讀數),繪制標準曲線(xiàn)( X-蛋白濃度μg/mL;Y-最終的OD 562nm)。依據標準曲線(xiàn)和樣品的稀釋倍數計算樣品蛋白濃度。


微信咨詢(xún)
地址:上海市浦東新區紫萍路908弄 傳真:021-50724961
©2024 和元李記(上海)生物技術(shù)有限公司 版權所有 All Rights Reserved.  備案號:滬ICP備2023007219號-1
性xxxxfreexxxxxvideo_成人无码网www在线观看_国产精品一区二区在线观看_大香蕉在线国产视频网手机版